线性化载体自重组方法构建pBait-AbAi

诱饵DNA一般选择顺式作用元件或者启动子序列，顺式元件作为诱饵时单个元件尽量小于20 bp，串联重复2-3次作为诱饵DNA；如果顺式作用元件超过100 bp，使用1个拷贝即可；启动子序列作为诱饵时不要包含TATA box。

引物设计示例：

通过PCR形成线性的带有插入片段的载体分子，插入片段位于所形成的线性分子两端，且两端有10-15bp的同源序列；将纯化的线性载体分子转入感受态细菌，该线性分子两端同源的10-15bp可在菌体内酶的作用下发生同源重组，线性分子两端的插入片段拼接到一起，形成真正的目的片段，进而完成环化，形成重组质粒。

该方法不仅避免了传统方法中两条寡核苷酸链退火成双链时效率低下的问题，还由于无需酶切载体和连接而大大节省实验时间和成本。